校準顯微鏡可把一個不同的標準片觀察結果
校準
對系統(tǒng)的校準采用一系列已知反射率的標準片(1SO 7404／5)，并浸入
已知反射系數(shù)的油和已過濾的光中進行校準(比如反射率為1．518的浸油和
波長為546nm的光)。校準包括將光度計的輸出量調至零，以符合零反射率
，并將某一已知的值調至符合某一已知反射率。這樣，標本的反射率就可
以通過相似的方程計算出來。零反射率標準片可使用一塊具5mm寬、5mm深
空洞的樹脂，將洞充滿浸油(1SO 7407／5)或不反射的“黑色物體”，將其
置于物鏡下，把光度計調節(jié)至零。建議在光線亮度很低的房間中進行操作
，以最大程度減少光度計內“殘留”的光或外界的光線“悄悄”進入光度
計。
把一塊標準片放在物鏡下，調節(jié)鏡臺的X和丫控制軸，直至無紋區(qū)域處
于標準片的拋光面上已標記的圓圈中為止。將光度計的值調至中等范圍。
當校準標準片時，要保持房間低亮度，才能對“殘留光”進行測試；但是
在房間完全變暗時，要觀察一下光度計的數(shù)值是否減少，如減少，說明測
試時的暗度還達不到要求。一旦校準之后，要把目鏡中的交叉線移動至標
準片上另一處無紋區(qū)域——這時光度計上的讀數(shù)應保持不變。附帶的校準
方法是可以把一個不同的標準片放在已校準的顯微鏡下，觀察其得到的結
果是否與預期值完全相符。ISO 7404／5推薦使用3個較好間隔的標準片，
以檢查多重校準標準片的線性關系。經(jīng)過校準后，就可以把標本放在物鏡
下進行測量和讀數(shù)。在讀數(shù)時不要改變房間內的低亮度，理想的房間溫度
應保持在23~(2±3~C內。在獲得標本的足夠數(shù)量的數(shù)據(jù)之后，要把標準片
放回到物鏡下，同時檢驗標準片與最初的校準值是否保持不變。]6．5 讀
數(shù)
根據(jù)ISO 7404／5 1984(E)，推薦的讀數(shù)數(shù)量為：(a)如98％小于0．35
，要讀取100個數(shù)據(jù)；(b)如介于O．35％—0．7％，至少要500個；如大于0
．7％，至少要1 000個(這明顯不切實際，除非是自動系統(tǒng))。其結果應當
呈現(xiàn)平均隨機反射率的百分比和標準的偏差。
