細菌細胞或菌落鑒別專業(yè)型圖像光學顯微鏡
純培養(yǎng)
在鑒別各種菌株時,應首先分離單一的細菌細胞或由該菌株的細胞
生成的菌落,并必須把這種單一的細菌細胞或菌落移植到適當培養(yǎng)基上
,進行純化。為獲得純培養(yǎng)( pure culftre)菌的分離方法,有下面三種
。
平板法原則上說,細菌在固體培養(yǎng)基上不能運動。如果各個細胞孤
立地接種在培養(yǎng)基上,則經(jīng)一定時間后,它們發(fā)育成肉眼可觀察的菌落(
colony)。即,1個菌落是由1個細菌發(fā)育來的。如果把這個菌落移到別
的培養(yǎng)基上又增殖,則就獲得了該菌株的純培養(yǎng)。象這樣為獲得純培養(yǎng)
的方法,通常用平板培養(yǎng)基進行。但具體作法有如下兩種。
(1)涂抹培養(yǎng)法:這是把細菌或含菌材料涂抹在平板培養(yǎng)基的表面,使
之形成菌落的種方法。從各種被檢材料中分離細菌時,主要采用這種方
法。
(2)混合平板培養(yǎng)法:是將加熱溶化的固體培養(yǎng)基保持在45℃,加入細
菌懸液,混合后倒入平皿,使之凝固成平板培養(yǎng)基的一種方法。在這種
情況下,細菌在培養(yǎng)基中形成菌落。在計算各種材料中所含菌數(shù)時,主
要使用這種方法。也就是所謂菌數(shù)平板計算法。
單個細菌培養(yǎng)法這是使用已校正過的徼量吸管,在顯微鏡下一邊觀
察,一邊吸取1個細菌,接種到培養(yǎng)基上的一種方法。由于這種方法所用
的器減價錢很貴,而且需要熟練的技術,所以只有在特殊的場合下才應
用。
稀釋培養(yǎng)法將細菌懸液按遞增法進行稀釋,若取一定量的每種稀釋
液進行培養(yǎng),則在出現(xiàn)生長的最終稀釋液中,估計有一個細胞。
把由這種稀釋液生長出來的培養(yǎng)物,看作是純培養(yǎng)。這種方法是不
正確的,因此基本上已不用它來獲得純培養(yǎng)。但是,若用對某種菌有選
擇性的液體培養(yǎng)基,按上述方法稀釋培養(yǎng)某種被檢材料時,則根據(jù)出現(xiàn)
生長的培養(yǎng)基所接種的被檢材料的稀釋度,可以大概算出1克或1毫升被
檢材料中的該菌的菌數(shù)。
